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最近这段时间总有小伙伴问小编基因表达载体构建步骤是什么，小编为此在网上搜寻了一些有关于基因表达载体构建步骤的知识送给大家，希望能解答各位小伙伴的疑惑。
操作步骤如下：
1、用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现缺口，露出黏性末端；
2、再用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端；
3、将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处；
4、再使碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，碱基之间形成氢键；
5、再加入适量的DNA连接酶，催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组DNA分子。
